ANALIS KESEHATAN: PRAKTIKUM V & VI

PRAKTIKUM V

Pertemuan / Kelompok : Ke 6(Emapat) / I (Satu)

Judul Praktikum : Pewarnaan BTA

Bahan Pemeriksaan : Sputum

Hari / Tanggal : Senin,11 April 2011

Nama : Nursakinah.s

Nim : PO.71.3.203.10.1.065

Tujuan Praktikum : Untuk mengamati dan mengetahui bentuk bakteri yang termasuk bakteri bacil tahan asam (BTA).

Prinsip Kerja : Bakteri bacil tahan asam sangat banyak mengandung lipid,asam lemak, dan kandungan inilah yang mencerminkan sifat tahan asam pada golongan bakteri tersebut antara lain asam mikolat. Bacil tahan asam (BTA) mampu mempertahankan zat warna carbol fuchsin,meskipun telah didekolorisasi dengan asam alcohol.

Metode : Ziehl Nelsen (Zn)

Dasar Teori

Pewarnaan ziehl nelsen disebut pewarnaan tahan asam karena pada beberapa jenis bakteri sukar dilakukan pewarnaan, tetapi sekali dapat tercat tidak mudah untuk dilunturkan meskipun dengan menggunakan zat peluntur (decolorizing agent) asam. Yang termasuk pada golongan bakteri yang sukar dicat adalah dari genus Mycobacterium (Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium leprae, Mycobacterium smegmatis).

Bakteri Mycobacterium tuberculosis yang menyebabkan penyakit TBC. Mycobacterium tuberculosis adalah bakteri yang berbentuk batang,tahan asam,gram positif,tidak bergerak,obligate aerob,tidak mempunyai kapsul,tumbuh lambat pada perbenihan sehingga memerlukan waktu antara 4-6 minggu.

Mycobacterium tuberculosis menyebabkan penyakit TBC yang menyerang paru-paru, tulang, kelenjar limfa, ginjal, otak dan kadang-kadang kulit. Organ tubuh yang pertama kali diserang biasanya paru-paru, karena penularan melalui udara pernapasan, baik dari percikan ludah pada waktu penderita batuk atau bercakap-cakap.

Pada pewarnaan BTA ini,menggunakan 3 macam reagen yang berbeda,yaitu:

1. Carbol Fuchsin

2. Asam Alkohol

3. Methylen Blue

Persiapan Praktik

Alat : - Objek glass

- Lampu spiritus

- Pipet tetes

- Mikroskop

- Korek api

- Jarum ose / lidi

- Jembatan pewarnaan

Reagen : - Larutan Carbol Fuchsin

- Larutan Asam alcohol

- Larutan Methylen Blue

Bahan : - Sputum

- Oil imersi

Prosedur Kerja

· Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan.

· Siapkan objek glass yang bersih dan bebas dari lemak.

· Lakukan fiksasi terhadap jarum ose atau lidi diatas lampu spiritus agar steril.

· Ambil sampel (sputum) dengan menggunakan jarum ose atau lidi yang sudah dipanaskan tadi.

Letakkan diatas objek glass,dan ratakan sampelnya.

· Keringkan sediaan tersebut.

· Setelah kering, lakukan fiksasi diatas nyala api.

· Letakkan diatas jembatan pewarnaan dan siap untuk diwarnai.

· Pipet reagen carbol fuchsin sebanyak 2-3 tetes, dan diamkan selama 5 menit sambil dipanaskan hingga berasap (jangan mendidih) sebanyak 3x selama 5 menit waktu pengeringan tadi.

· Bilas sediaan tadi dengan air mengalir.

· Lunturkan (dekolorisasi) dengan menggunakan asam alcohol.

· Bilas sediaan dengan air mengalir

· Pipet reagen methylen blue sebanyak 2-3 tetes dan diamkan selama 2-3 tetes.

· Bilas sediaan dengan air mengalir.

· Setelah itu, keringkan sediaan.

· Tetesi oil imersi sebanyak 1 tetes.

· Amati dibawah mikroskop dengan menggunakan pembesaran objektif 100x.

Hasil Pengamatan

Tidak ditemukan bakteri Bacil Tahan Asam.

Kesimpulan

Dari hasil pengamatan ini,dapat disimpulkan bahwa tidak ditemukan bakteri Bacil Tahan Asam (BTA), pada pemeriksaan sputum dengan pewarnaan BTA, dengan menggunakan metode Ziehl Nelsen (Zn).

Makassar,14 Maret 2011

Praktikan

Nursakinah

PO.71.3.203.10.1.065

Mengetahui

Dosen Pembimbing Praktek

H.Syamsul Bakhri AK. S.Pd.,M.Si Hasnawati, S.Si Mukhlis, AMAK

PRAKTIKUM VI